标本采集与处理 1.检查时机 脑脊液穿刺的时机与疾病有关,化脓性脑膜炎于发病后1~2d、病毒性脑膜炎于发病后3~5d、结核性脑膜炎于发病后1~3周、疱疹性脑膜炎于流行性感冒前驱症状期开始后5~7d穿刺采集标本。 2.标本采集 腰椎穿刺成功后立即测定脑脊液压力,然后留取脑脊液标本于3个无菌试管中,每个试管1~2ml。第一管作病原生物学检验,第二管作化学和免疫学检验,第三管作理学和细胞学检验。标本采集后应立即送检,并于1h内检验完毕。 标本放置过久,可造成细胞破坏、葡萄糖等物质分解、细菌溶解等,影响检验结果;标本应尽量避免凝固或混入血液,若混入血液应注明。 理学检查 1.颜色 正常脑脊液无色透明,新生儿胆红素较多可呈黄色。 当中枢神经系统有炎症、损伤、肿瘤或梗阻时,破坏了血-脑脊液屏障,使脑脊液成分发生改变,而导致其颜色发生变化。脑脊液呈黄色称为黄变症。 2.透明度 正常脑脊液清晰透明。脑脊液的透明度与其所含的细胞数量和细菌多少有关,当脑脊液白细胞超过×/L时,可呈浑浊;脑脊液中蛋白质明显增高或含有大量细菌、真菌时,也可使脑脊液浑浊。结核性脑膜炎的脑脊液可呈毛玻璃样的浑浊,化脓性脑膜炎的脑脊液呈脓性或块样浑浊,穿刺损伤性脑脊液可呈轻微的红色浑浊。 3.凝固性 正常脑脊液放置12~24h后不会形成薄膜、凝块或沉淀。 脑脊液形成凝块或薄膜与其所含的蛋白质,特别是与纤维蛋白原的含量有关,当脑脊液蛋白质含量超过10g/L时,可出现薄膜、凝块或沉淀。化脓性脑膜炎的脑脊液在1~2h内呈块状凝固;结核性脑膜炎的脑脊液在12~24h内呈薄膜或纤细的凝块;神经梅毒的脑脊液可有小絮状凝块;蛛网膜下腔梗阻的脑脊液呈黄色胶样凝固。 脑脊液同时存在胶样凝固、黄变症和蛋白质-细胞分离(蛋白质明显增高,细胞正常或轻度增高),称为Froin-Nonne综合征,这是蛛网膜下腔梗阻的脑脊液特点。 4.比密 脑脊液比密为:腰椎穿刺1.~1.,脑室穿刺1.~1.,小脑延髓池穿刺1.~1.,凡是脑脊液中的细胞数量增加和蛋白质含量增高的疾病,其比密均增高。常见于中枢神经系统感染、神经系统寄生虫病、脑血管病、脑肿瘤、脑出血、脑退行性变和神经梅毒等。 显微镜检查 质量控制 (1)细胞计数: ①标本采集后应在1h内进行细胞计数。标本放置过久,细胞可能凝集成团或被破坏,影响计数结果。 ②标本必须混匀后方可进行检查,否则会影响计数结果。 (2)校正与鉴别: ①因穿刺损伤血管,引起血性脑脊液,白细胞计数结果必须校正,以消除因出血带来的白细胞。 ②细胞计数时,应注意红细胞、白细胞与新生隐球菌的鉴别。新生隐球菌不溶于乙酸,加优质墨汁后可见未染色的荚膜;白细胞也不溶于乙酸,加酸后细胞核和细胞质更加明显;红细胞加酸后溶解。 化学与免疫学检查 蛋白质 脑脊液蛋白质含量增高是血-脑脊液屏障功能障碍的标志。由于脑脊液清蛋白只来自血清,因此,RAlb更能反映血-脑脊液屏障完整性。脑脊液蛋白质增高可见于中枢神经系统的感染、梗阻和出血等多种疾病。 蛋白商反映了脑脊液球蛋白与清蛋白的比例变化。 ①蛋白商增高:提示脑脊液球蛋白含量增高,见于多发性硬化症、神经梅毒、脑脊髓膜炎、亚急性硬化性全脑炎等。 ②蛋白商减低:提示脑脊液清蛋白含量增高,见于化脓性脑膜炎急性期、脑肿瘤、脊髓压迫症等。 葡萄糖 1.检测原理 脑脊液葡萄糖含量大约为血糖的50%~80%(平均60%),其高低与血糖浓度、血-脑脊液屏障的通透性、葡萄糖的酵解程度有关。脑脊液葡萄糖检验多采用葡萄糖氧化酶法和己糖激酶定量法。 2.临床意义 (1)葡萄糖减低: ①细菌性脑膜炎和真菌性脑膜炎,以化脓性脑膜炎早期减低最明显; ②脑寄生虫病等; ③脑肿瘤; ④神经梅毒; ⑤低血糖昏迷、胰岛素过量所致的低血糖状态。 (2)葡萄糖增高: ①新生儿及早产儿; ②糖尿病或静脉注射葡萄糖; ③脑或蛛网膜下腔出血所致的血性脑脊液; ④病毒性脑膜炎或脑炎; ⑤急性颅脑外伤、中毒、缺氧、脑出血等所致丘脑下部损伤等。 氯化物 1.检测原理 由于脑脊液中蛋白质含量较少,为了维持脑脊液和血浆渗透压的平衡(Donnan平衡),氯化物含量约为血浆的1.2~1.3倍。氯化物定量检验方法与血清氯化物检验方法相同,测定方法有硝酸汞滴定法、电量分析法、离子选择性电极法和硫氰酸汞比色法。临床常用电极法。 2.临床意义 (1)氯化物减低: ①细菌或真菌感染,特别是化脓性、结核性和隐球菌性脑膜炎的急性期、慢性感染的急性发作期。 ②细菌性脑膜炎的后期,由于脑膜有明显的炎症浸润或粘连,局部有氯化物附着,使脑脊液氯化物减低。 ③呕吐、肾上腺皮质功能减退时,由于血氯减低,使脑脊液氯化物含量亦减低。 (2)氯化物增高:主要见于尿毒症、肾炎、心力衰竭、病毒性脑膜炎或脑炎。 病原生物学检查 细菌学检查 1.显微镜检查 脑脊液涂片革兰染色或碱性亚甲蓝染色检查致病菌。 革兰染色用于检查肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、葡萄球菌、铜绿假单胞菌、链球菌、大肠埃希菌等;碱性亚甲蓝染色用于检查脑膜炎球菌。显微镜检查对化脓性脑膜炎诊断的阳性率为60%~90%。 如果怀疑为结核性脑膜炎,可采用抗酸染色,油镜下寻找抗酸杆菌。 新生隐球菌检查常采用印度墨汁染色法,若呈假阳性,可采用苯胺墨染色法。 2.细菌培养 主要适用于脑膜炎奈瑟菌、链球菌、葡萄球菌、大肠埃希菌、流感嗜血杆菌等。同时,也要注意厌氧菌、真菌的培养。 寄生虫检查 1.脑脊液涂片检查 可发现血吸虫卵、肺吸虫卵、弓形虫、阿米巴滋养体等。 2.脑囊虫检查 脑囊虫补体结合试验诊断脑囊虫的阳性率可达88%;致敏乳胶颗粒玻片凝集试验诊断脑囊虫的符合率为90%;ELISA法对诊断脑囊虫病具有高度的特异性。 3.梅毒螺旋体检查 神经梅毒的诊断首选灵敏度、特异性均很高的螺旋体荧光抗体吸收试验(FTA-ABS);其次选用性病研究实验室玻片试验(VDRL),其灵敏度为50%~60%,特异性为90%。 现多使用快速血清反应素试验(RPR)为筛检,梅毒螺旋体微粒凝集试验(TPPA)为梅毒确诊试验。常见中枢系统疾病脑脊液检查结果
疾病
外观
凝固
蛋白质
葡萄糖
氯化物
细胞增高
细菌
化脓性脑膜炎
浑浊
凝块
↑↑
↓↓↓
↓
显著,多核细胞
脓菌
结核性脑膜炎
浑浊
薄膜
↑
↓
↓↓
中性,淋巴
结核菌
病毒性脑膜炎
透明或微浑
无
↑
正常
正常
淋巴细胞
无
隐球菌性脑膜炎
透明或微浑
可有
↑↑
↓
↓
淋巴细胞
隐球菌
流行性乙脑
透明或微浑
无
↑
正常或↑
正常
中性,淋巴
无
脑出血
血性
可有
↑↑
↑
正常
红细胞
无
蛛网膜下腔出血
血性
可有
↑↑
↑
正常
红细胞
无
脑肿瘤
透明
无
↑
正常
正常
淋巴细胞
无
脑脓肿
透明或微浑
有
↑
正常
正常
淋巴细胞
有或无
神经梅毒
透明
无
正常
正常
↑
淋巴细胞
无
脑脊液检查对不同疾病诊断的灵敏度和特异度
疾病
灵敏度(S)
特异性(Sp)
细菌性,结核性、真菌性脑膜炎
高
高
病毒性脑膜炎、蛛网膜下腔出血、多发性硬化症、中枢神经系统梅毒、感染性多神经根炎
高
中
脑膜恶性疾病
中
高
颅内出血、病毒性脑炎、硬膜下血肿
中
中
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