ARPE-19人视网膜色素上皮细胞是人类视网膜的关键细胞类型之一，是一种具有内皮细胞特征的多角形细胞，可维持血脑屏障的完整性，同时对光感受器和周围组织的维护也起重要作用。在许多眼科疾病中，包括AMD、RPE综合征和炎症性疾病等，ARPE-19上皮细胞都被广泛应用于研究和治疗。在本文中，我们将介绍ARPE-19人视网膜色素上皮细胞培养的实验技术。
细胞培养4倍成像1.培养基配制
ARPE-19上皮细胞的培养基非常关键，它直接影响到细胞的生长和生存。ARPE-19上皮细胞需要使用DMEM/F12培养基，其中DMEM占三分之一，F12占三分之二。添加3.7g/L的碳酸氢钠，ml/L的胎牛血清和IU/L的青霉素/mg/L的链霉素。将所有的成分混合均匀，并过滤消毒后静置制备。培养基的pH值应该在7.2-7.5之间，最好在细胞培养前将培养基预热到37℃，无菌操作。
2.细胞分离和培养
ARPE-19细胞可以从ATCC获得，一旦获得，应该立即储存到液氮中。在将细胞解冻后，应该使用PBS洗涤一次来去除DMSO。将细胞向培养瓶中加入15ml的DMEM/F12培养基，并用20ml的温水浸泡。在把培养液倒掉之前，将瓶子来回摇动数下，以使细胞松散。把细胞移植到25cm2的细胞培养板中，每个板加入4-5ml的培养基。将细胞放置于37℃的恒温培养箱内，5%CO2环境下培养。
3.细胞常规检测
在体外培养过程中，必须进行定期的细胞检查和培养基更换。一旦细胞长到80-90%的密度，它们应该剥离下来并分离到下一个培养板中。检测细胞的纯度和细胞的形态是否正常。正常的细胞是有规则的菱形形态，在显微镜下呈现出明亮、半透明的外观，不应该出现任何污染。
4.细胞的传代
当细胞密度达到80-90%时，它们应该进行传代。使用1ml的Trypsin巴贝胆汁混合物来剥离细胞。把细胞吸成单个细胞，将其分离到新的培养皿中。应该注意，传代不应该超过3次。
细胞培养10倍成像5.实验的保障
在进行ARPE-19的实验前，进行必要的生物安全操作，并获得实验室管理部门的许可。所有的实验都应该在无菌的条件下进行。实验期间，禁止食品进入实验室，同时禁止任何的化学和制服以及其他危害试验操作者的物品纤维进入实验室。
综上所述，ARPE-19人视网膜色素上皮细胞的培养实验技术非常关键，并需要进行定期的细胞检测和培养基的更换。只有确保实验中细胞的纯度和形态的正常，才能获得可靠的实验结果。